灵芝孢子粉破壁工艺与装备(一)

  • 灵芝孢子粉是 80 年代开发的新药源。 灵芝孢子有二层由几丁质和葡聚糖构成的孢壁 (多醣壁),且具有同心圆的层网结构, 质地坚韧, 耐酸碱, 极难氧化分解, 因此限制了人们对孢内有效物质的消化吸收。 为了充分利用灵芝孢子内的有效物质, 必需对孢子粉进行破壁, 以便于人们对其有效物质的利用。国内外科技工作曾对灵芝孢子粉破壁工艺进行多年、 多方案的探讨, 有的已取得较高的破壁率, 现把我们自 1996 ~ 1998 做的一系列灵芝孢子粉破壁试验结果和开发的专用设备及存在问题介绍如下。

    1 材料与方法

    1.1 材料 灵芝孢子粉由福建省食用菌技术联合开发总公司提供的松溪县产段木灵芝孢子粉。灵芝孢子粉的物性测定:用日产 LMS —24 激光散射式粒度分布测定仪对孢子粉粒径分布和松装密度进行测定 (见图 1略)。

      平均粒径:7.123μm ;最大粒径 :13.984μm;最小粒经:5.032μm:集中平均粒径:8.388μm (占17.64 %) 孢子粒堆集密度:1g/ cm3。 收购后孢子粉含水率:≤12%, 在 50 ℃温度下用带排风电烘箱干燥 20h 含水率达<6%。< span="">溶壁酶由广东省微生物研究所提供。 灵芝发酵液由福州闽江真菌研究所提供

    1.2 仪器 生物显微镜 (上海莱卡-EMED -6);恒温水浴锅;索氏提取器。

    1.3 设备 高压均质机—上海申鹿均质机厂;高剪切混合乳化机—上海威宇机电设备公司 ;超声粉碎机一美产;三维振动分离筛;STJ 型扁平气流超微粉碎机一日产;250 型孢子粉破壁机 (自制)。

    1.4 方法

    1.4.1 破壁率的测定:取破壁和未破壁孢子粉各1g , 放 在 曲 面 玻 璃 上, 进 行 4h 真 空 干 燥(<50℃)。 用电光分析天平 (精度 ±0.1μg) 分别秤取干燥孢子粉 2μg , 放入 10mL 试管中, 再用精密手持滴管在各试管中加入 2mL 的蒸馏水, 并用振荡搅拌 5min 成悬浊液待用。 用微细玻璃管各吸悬浊液分别滴入血球计数板上, 并放在显微镜下观察, 并按规定计数代入公式:(A-B)/A。 A 为破壁前完整孢子数, B 为破壁后完整孢子数。

    1.4.2 酶法破壁 Ⅰ -溶壁酶破壁法:灵芝孢子粉经 50℃干燥 1h 称量后进行前处理 , 再经化学溶液灭菌处 理后, 用 pH6 缓 冲液 配 成浓 度为 0.5 %(w/ v)的孢子粉悬浊液, 在 30 ~ 40 ℃的水浴中, 不断搅拌下加入溶壁酶, 使酶的浓度达到 2%或 5 %进行酶解反应, 反应结束后, 取样按规定, 测定破壁率 (见表 1略)。

    1.4.3 酶法破壁 Ⅱ -灵芝自身酶解破壁法:孢子粉经 50℃干燥 1h 称量, 再经化学溶液灭菌处理后,用 pH6 缓冲液配成浓度为 0.5%(W/V)的孢子悬浊液, 并按体积比为 1∶1 加入去除菌丝体后的灵芝发酵液, 置 30 ~ 35℃水浴中不断搅拌进行酶解 45h,取样按规定测定破壁率为 30 %。

    1.4.4 机械 、物理法Ⅰ -高压均质机破壁法(湿法):在 10L 的水中放 50g 灵芝孢子粉, 混合成悬浊液, 放入高压均质机的料斗中, 开动设备, 调节流量和工作压力由 30Mpa※70Mpa (700 大气压力),在最高工作压力中 连续重复均 质 3 次, 时间约0.5h, 取样测定破壁率, 结果无破壁现象。

    相关文献>>灵芝孢子粉破壁工艺与装备(二)